前言

近年來，隨著集約化、規(guī)模化養(yǎng)殖的迅速發(fā)展，動(dòng)物免疫力下降、疾病頻發(fā)、用藥頻繁、畜產(chǎn)品質(zhì)量降低等問題日漸凸顯，逐漸成為了消費(fèi)者關(guān)注的焦點(diǎn)。因此，在動(dòng)物飼糧中添加綠色添加劑來提高動(dòng)物生長(zhǎng)性能、增強(qiáng)免疫功能、調(diào)節(jié)腸道健康、改善肉品質(zhì)成為目前的研究熱點(diǎn)。酶制劑、益生菌是動(dòng)物生產(chǎn)中研究較為廣泛的飼料添加劑，具有提高動(dòng)物生長(zhǎng)性能、增強(qiáng)免疫力、改善腸道健康、提高肉品質(zhì)等功能。研究表明，在生長(zhǎng)豬飼糧中添加復(fù)合酶可顯著提高平均日增重（ADG）、干物質(zhì)和氮的表觀消化率，顯著降低飼料成本。研究表明，在飼糧中添加復(fù)合酶（淀粉酶、蛋白酶、木聚糖酶）可調(diào)節(jié)腸道菌群平衡和腸道短鏈脂肪酸（SCFAs）水平。復(fù)合益生菌可顯著提高豬只生長(zhǎng)性能，降低血清白介素6（IL-6）、干擾素γ（IFN-γ）及排泄物中NH和HS的濃度，調(diào)節(jié)SCFAs水平。目前有關(guān)酶制劑、益生菌等單一物質(zhì)在動(dòng)物生產(chǎn)中的應(yīng)用較多，酶制劑、益生菌聯(lián)合應(yīng)用的效果及機(jī)制有待深入研究。基于此，本試驗(yàn)旨在研究飼糧中添加復(fù)合益生菌和酶制劑對(duì)生長(zhǎng)育肥豬生長(zhǎng)性能、肉品質(zhì)、抗氧化性能及腸道SCFAs的影響，以期為益生菌、酶制劑在養(yǎng)豬生產(chǎn)中的聯(lián)合應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

01材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

復(fù)合益生菌由本實(shí)驗(yàn)室自主培養(yǎng)制備，含植物乳桿菌、銀杏乳酸菌和釀酒酵母，每種菌添加量均為0.5×109CFU/kg。酶制劑提供，含有蛋白酶（活力為36000U/g）和淀粉酶（中溫α淀粉酶活力為1000U/g、普魯蘭酶活力為100U/g、糖化酶活力為8000U/g。

1.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼糧

選取日齡和體重相近（約45kg）的健康生長(zhǎng)豬（約克夏×榮昌）40頭，公母各半（公豬為閹公豬），隨機(jī)分為對(duì)照組和試驗(yàn)組，每個(gè)組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)5頭豬。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組飼喂基礎(chǔ)飼糧+0.1g/kg酶制劑+1.5×109CFU/kg復(fù)合益生菌。試驗(yàn)預(yù)試期3天，正試期63天。試驗(yàn)期間自由采食與飲水，免疫和飼養(yǎng)管理按常規(guī)方法進(jìn)行。每天監(jiān)測(cè)豬群的健康狀況，記錄豬的死淘情況。基礎(chǔ)飼糧為玉米-豆粕型無抗基礎(chǔ)飼糧，參照《豬營(yíng)養(yǎng)需要量》（GB/T39235—2020）配制，飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分見表1。

1.3樣品采集及指標(biāo)測(cè)定

1.3.1生長(zhǎng)性能

試驗(yàn)期間，每天記錄各重復(fù)采食量，計(jì)算平均日采食量（ADFI）；在正式試驗(yàn)開始第1天和第63天早晨空腹8小時(shí)以上后稱重，計(jì)算ADG和耗料增重比（F/G）。計(jì)算公式：

ADG（kg/d）=總增重/試驗(yàn)天數(shù)

ADFI（kg/d）=飼糧消耗量/試驗(yàn)天數(shù)

F/G=累計(jì)飼料消耗量/（末重−初重）

1.3.2肉品質(zhì)

在試驗(yàn)第63天早晨，每個(gè)重復(fù)選取1頭接近平均體重的豬，空腹8h以上后屠宰，取左側(cè)胴體背最長(zhǎng)肌，參照《豬肉品質(zhì)測(cè)定技術(shù)規(guī)程》（NY/T821—2019）進(jìn)行肉品質(zhì)檢測(cè)。

1.3.3血清免疫指標(biāo)

在試驗(yàn)第63天早晨，每個(gè)重復(fù)選取l頭接近平均體重的豬，采集頸靜脈血10mL，置于促凝采血管中，靜置2~3h后4℃、3000r/min離心10min，取上清液分裝到1.5mL離心管中，并于-20℃保存?zhèn)溆谩０凑漳暇┙ǔ煽萍加邢薰驹噭┖姓f明書測(cè)定豬血清中免疫球蛋白（IgA、IgG、IgM）和細(xì)胞因子（IL-1β、IL-2、IL-6、IL-10）的含量，測(cè)定儀器為酶標(biāo)儀（SynergyH1，GeneCompanyLimited）。

1.3.4肌肉抗氧化指標(biāo)

屠宰后取左側(cè)胴體背最長(zhǎng)肌，按照試劑盒說明書檢測(cè)肌肉丙二醛（MDA）、還原性谷胱甘肽（GSH）含量及總抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化酶（GSH-Px）等指標(biāo)。測(cè)定儀器為酶標(biāo)儀（SynergyH1，GeneCompanyLimited）。

1.3.5盲腸內(nèi)容物

SCFAs屠宰后迅速結(jié)扎盲腸兩端，取盲腸中段內(nèi)容物分裝于數(shù)個(gè)無菌EP管中，液氮速凍后置于-80℃冰箱中保存待測(cè)。采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（GC-MS）測(cè)定盲腸內(nèi)容物中SCFAs含量。

1.4統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS26.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，分析方法為獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。結(jié)果采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示，其中，P>0.05為差異不顯著，P<0.05為差異顯著，0.05≤P<0.10作為趨勢(shì)性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

02試驗(yàn)結(jié)果

2.1飼糧中添加復(fù)合益生菌和酶制劑對(duì)生長(zhǎng)育肥豬生長(zhǎng)性能的影響

由表2可知，與對(duì)照組相比，飼糧中添加復(fù)合益生菌和酶制劑有提高豬只末重（P=0.09）、降低ADFI（P=0.09）和F/G（P=0.08）的趨勢(shì)，對(duì)ADG無顯著影響（P>0.05）。

2.2飼糧中添加復(fù)合益生菌和酶制劑對(duì)生長(zhǎng)育肥豬肉品質(zhì)的影響

由表3可知，飼糧中添加復(fù)合益生菌和酶制劑可提高生長(zhǎng)育肥豬屠宰后肌肉pH1、降低滴水損失（P

2.3飼糧中添加復(fù)合益生菌和酶制劑對(duì)生長(zhǎng)育肥豬血液免疫指標(biāo)的影響

由表4可知，與對(duì)照組相比，飼糧中添加復(fù)合益生菌和酶制劑可提高生長(zhǎng)育肥豬血清中IgA、IgG以及細(xì)胞因子IL-2、IL-10水平（P

2.4飼糧中添加復(fù)合益生菌和酶制劑對(duì)生長(zhǎng)育肥豬肌肉抗氧化性能的影響

由表5可知，飼糧中添加復(fù)合益生菌和酶制劑對(duì)生長(zhǎng)育肥豬肌肉抗氧化性能均無影響（P>0.05）。

2.5飼糧中添加復(fù)合益生菌和酶制劑對(duì)生長(zhǎng)育肥豬盲腸SCFAs的影響

由表6可知，飼糧中添加復(fù)合益生菌和酶制劑對(duì)生長(zhǎng)育肥豬盲腸SCFAs、含量無影響（P>0.05）

03討論

3.1飼糧中添加復(fù)合益生菌和酶制劑對(duì)生長(zhǎng)育肥豬生長(zhǎng)性能的影響

研究表明，動(dòng)物飼糧中添加酶制劑和益生菌可提高其生長(zhǎng)性能。研究發(fā)現(xiàn)，在生長(zhǎng)育肥豬飼糧中添加0.01%蛋白酶可顯著提高ADG、顯著降低F/G。研究表明，在斷奶仔豬飼糧中添加復(fù)合益生菌（枯草芽孢桿菌、糞腸球菌）可顯著提高ADG、ADFI，顯著降低F/G。此外，在生長(zhǎng)豬飼糧中添加復(fù)合酶（木聚糖酶、β-葡聚糖酶、α-阿拉伯呋喃糖苷酶和植酸酶）可顯著提高鈣和磷的表觀回腸消化率以及粗蛋白質(zhì)、鈣和磷的表觀總消化率，從而提高其生長(zhǎng)性能。本研究表明，飼糧中添加復(fù)合益生菌和酶制劑有提高豬只末重、降低ADFI和F/G的趨勢(shì)，說明飼糧中添加復(fù)合益生菌和酶制劑具有提高生長(zhǎng)育肥豬生長(zhǎng)性能的作用。這可能是因?yàn)橥庠匆嫔趧?dòng)物腸道定植后，可增強(qiáng)動(dòng)物腸道微生物代謝；酶制劑可補(bǔ)充動(dòng)物體內(nèi)含量不足和一些動(dòng)物自身不能合成的酶。由此可見，在飼糧中添加益生菌和酶制劑能促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，從而提高動(dòng)物的飼料轉(zhuǎn)化3.2飼糧中添加復(fù)合益生菌和酶制劑對(duì)生長(zhǎng)育肥豬肉品質(zhì)的影響

肉品質(zhì)是決定豬肉價(jià)值的重要因素。pH可通過調(diào)控蛋白質(zhì)活性影響肉的顏色、持水力。在本試驗(yàn)中，飼糧中添加復(fù)合益生菌和酶制劑可顯著提高豬肉pH，但對(duì)肉色L*、肉色a*、肉色b*沒有顯著影響。持水力又稱系水力，對(duì)肉的嫩度、顏色和營(yíng)養(yǎng)組成都有影響。本試驗(yàn)表明，飼糧中添加復(fù)合益生菌和酶制劑可顯著降低肌肉滴水損失，說明飼糧中添加復(fù)合益生菌和酶制劑可改善豬肉持水力，進(jìn)而改善豬肉品質(zhì)。發(fā)現(xiàn)，在斷奶仔豬飼糧中添加植物乳桿菌ZJ316可改善肌肉pH、硬度、黏性、咀嚼性和恢復(fù)力。表明在育肥豬飼糧中添加復(fù)合益生菌可提高肉色、降低滴水損失。也表明，育肥豬飼喂復(fù)合益生菌（枯草芽孢桿菌、釀酒酵母和羅伊氏乳桿菌）固態(tài)發(fā)酵飼料可顯著降低豬肉的剪切力和滴水損失。綜合分析表明，在飼糧中添加益生菌和酶制劑可改善豬肉品質(zhì)。

3.3飼糧中添加復(fù)合益生菌和酶制劑對(duì)生長(zhǎng)育肥豬血液免疫指標(biāo)的影響

血清免疫指標(biāo)可反映動(dòng)物機(jī)體的免疫水平、代謝情況及健康狀況。研究發(fā)現(xiàn)，在斷奶仔豬飼糧中添加復(fù)合酶（淀粉酶、蛋白酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶）可顯著提高血清IgA、IgG和IgM濃度。研究表明，斷奶仔豬飼喂釀酒酵母發(fā)酵菜籽粕可顯著降低血清IL-1β、IL-6濃度，顯著增加IFN-γ濃度。研究表明，在斷奶仔豬飼糧中添加復(fù)合益生菌（丁酸梭菌、枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌）可顯著降低血清腫瘤壞死因子α（TNF-α）和IL-1β濃度。本試驗(yàn)也表明與對(duì)照組相比，飼糧中添加復(fù)合益生菌和酶制劑可顯著提高血清IgA、IgG、IL-2和IL-10水平。免疫球蛋白具有抗菌、抗病毒、抗感染等作用，白細(xì)胞介素是參與機(jī)體炎癥反應(yīng)的重要因子，血液免疫球蛋白、白細(xì)胞介素濃度可以反映機(jī)體的免疫水平和健康狀況。分析可見，飼糧中添加復(fù)合益生菌與酶制劑可通過提高血液免疫球蛋白、白細(xì)胞介素的濃度增強(qiáng)動(dòng)物的血液免疫功能，從而保證機(jī)體健康。

3.4飼糧中添加復(fù)合益生菌和酶制劑對(duì)生長(zhǎng)育肥豬肌肉抗氧化性能的影響

T-AOC、SOD、GSH和MDA都是機(jī)體抗氧化系統(tǒng)中的重要指標(biāo)。T-AOC反映了機(jī)體內(nèi)各種抗氧化分子的總體水平及機(jī)體的健康狀況。SOD是一種以超氧化物自由基為底物的重要抗氧化酶。GSH是反映機(jī)體所處氧化還原狀態(tài)的重要指標(biāo)。MDA是脂質(zhì)氧化的終產(chǎn)物，可反映機(jī)體內(nèi)脂質(zhì)過氧化程度及細(xì)胞損傷程度。研究發(fā)現(xiàn)，在飼糧中添加復(fù)合酶（真菌α-淀粉酶、酸性蛋白酶、木聚糖酶、β-甘露糖酶、葡萄糖氧化酶、酸性纖維素酶和半乳糖苷酶）可顯著提高仔豬肝臟和血清中GSH-Px濃度，顯著降低MDA濃度。研究表明，飼糧中添加益生菌（植物乳桿菌B90、釀酒酵母）和益生元（木糖、木三糖和木四糖）可提高斷奶仔豬結(jié)腸和血漿過氧化氫酶（CAT）、GSH-Px、SOD水平，降低結(jié)腸和血漿MDA、過氧化氫水平。研究表明，在飼糧中添加益生菌（丁酸梭菌、地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌）和益生元（酵母細(xì)胞壁、低聚木糖）可顯著提高豬只背最長(zhǎng)肌SOD活性、顯著降低臀部肌肉MDA活性。Li等研究結(jié)果表明，飼糧中添加益生菌可顯著降低斷奶仔豬脾臟、肝臟和空腸黏膜的MDA含量，顯著提高肝臟和回腸黏膜的T-AOC。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧中添加復(fù)合益生菌和酶制劑對(duì)生長(zhǎng)育肥豬抗氧化性能無顯著影響。由T-AOC、MDA、GSH等抗氧化分子組成的非酶類抗氧化系統(tǒng)和由GSH-Px、SOD、CAT等氧化還原酶組成的酶類抗氧化系統(tǒng)共同調(diào)控機(jī)體的抗氧化性能。因此，飼糧中添加酶制劑、益生菌可通過調(diào)節(jié)MDA含量、T-AOC和SOD、CAT等酶活性調(diào)控機(jī)體的抗氧化性能。

3.5飼糧中添加復(fù)合益生菌和酶制劑對(duì)生長(zhǎng)育肥豬盲腸SCFAs的影響

SCFAs是腸道微生物發(fā)酵利用食物中不可消化的碳水化合物的重要產(chǎn)物，主要包括乙酸、丙酸、丁酸等由1~6個(gè)碳原子組成的有機(jī)脂肪酸，具有調(diào)節(jié)腸道菌群平衡、增強(qiáng)腸道屏障功能、參與脂質(zhì)代謝、提高免疫力等生物學(xué)功能。研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加菊粉和益生菌（釀酒酵母、乳酸菌）可改變豬腸道SCFAs的組成。研究表明，飼糧中添加復(fù)合酶（淀粉酶、蛋白酶和木聚糖酶）可顯著提高仔豬盲腸和結(jié)腸乙酸、丙酸及總SCFAs含量。研究也表明，飼糧中添加益生菌（腸球菌、乳酸菌和雙歧桿菌）可顯著增加結(jié)腸乙酸含量。本試驗(yàn)中，生長(zhǎng)育肥豬飼糧中添加復(fù)合益生菌和酶制劑可增加盲腸丁酸含量，但差異不顯著。這可能與復(fù)合益生菌和酶制劑組成或添加量有關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，在生長(zhǎng)豬飼糧中添加不同含量復(fù)合益生菌（地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、嗜酸乳桿菌、釀酒酵母）對(duì)腸道SCFAs的影響不同，隨著日糧中復(fù)合益生菌含量的增加，乙酸鹽、丁酸鹽和總SCFAs濃度呈線性增加，說明復(fù)合益生菌對(duì)腸道SCFAs的影響與益生菌的添加量有關(guān)。

4、結(jié)論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，生長(zhǎng)育肥豬飼糧中添加0.1g/kg酶制劑和1.5×109CFU/kg復(fù)合益生菌可提高其生長(zhǎng)性能和免疫水平，改善肉品質(zhì)。

養(yǎng)殖專用加酶復(fù)合益生菌，養(yǎng)豬復(fù)合益生菌，養(yǎng)雞復(fù)合益生菌，鴨鵝養(yǎng)殖復(fù)合益生菌，牛羊養(yǎng)殖復(fù)合益生菌，特種動(dòng)物養(yǎng)殖復(fù)合益生菌，水產(chǎn)養(yǎng)殖復(fù)合益生菌

本產(chǎn)品運(yùn)用復(fù)合益生菌與復(fù)合酶制劑具有使用量少，對(duì)動(dòng)物腸道有保健效果，還可以提高對(duì)飼料的消化吸收率，減少養(yǎng)殖環(huán)境臭氣、氨氣的產(chǎn)生，促進(jìn)動(dòng)物糞便恢復(fù)成形。

【適用對(duì)象】畜禽、各種特種養(yǎng)殖動(dòng)物、水產(chǎn)動(dòng)物

【產(chǎn)品成分分析保證值】枯草芽孢桿菌、乳酸片球菌、沼澤紅假單胞菌等等合計(jì)≥200億cfu/g，水分＜9.0%。凈重：500克/袋。

使用說明書

【產(chǎn)品功能與特點(diǎn)】

◆改善腸道內(nèi)環(huán)境和微生態(tài)環(huán)境，抑制毒胺或氨的產(chǎn)生降低養(yǎng)殖欄舍中的臭味氨氣濃度；凋節(jié)動(dòng)物體內(nèi)微生態(tài)平衡，對(duì)動(dòng)物腸道內(nèi)有保健作用。

◆提高飼料效率，增強(qiáng)消化吸收，促進(jìn)生長(zhǎng)，提高飼料報(bào)酬，降低養(yǎng)殖成本，使用后動(dòng)物糞便的排泄量會(huì)減少，糞便逐漸恢復(fù)成形。

◆抗應(yīng)激：能夠減少飼養(yǎng)動(dòng)物因環(huán)境條件劇變惡化而產(chǎn)生的應(yīng)激，提高成活率。

◆凈化養(yǎng)殖環(huán)境，形成清潔養(yǎng)殖環(huán)境：排泄物中一樣保持有活菌，能夠在養(yǎng)殖環(huán)境中繼續(xù)繁殖，并自動(dòng)進(jìn)行發(fā)酵，抑制環(huán)境中病原菌的生長(zhǎng)，減少糞便的氨味、臭味、凈化環(huán)境，減輕污染。

◆能夠減輕或消除霉菌毒素對(duì)動(dòng)物的毒害作用，清除動(dòng)物體內(nèi)藥物激素殘留，改善肉蛋品質(zhì)，恢復(fù)自然養(yǎng)殖風(fēng)味。

◆水產(chǎn)動(dòng)物飼料中使用本品后，能夠減緩水質(zhì)惡化或有助于水體有益微生物繁殖，改善水質(zhì)，對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物腸道有保健功能。

【使用方法】

①養(yǎng)豬上的運(yùn)用：種豬、母豬、肉豬每噸飼料中使用500克。

②家禽上的運(yùn)用：肉禽蛋禽每噸飼料使用500克。

③兔子、牛、羊、馬等草食動(dòng)物、水產(chǎn)養(yǎng)殖上的運(yùn)用：每噸精飼料中添加500克。

④各種特種養(yǎng)殖動(dòng)物上的運(yùn)用：每噸飼料中添加1000克。

⑤飲水，每1000公斤清水加入本品200克，2小時(shí)后飲用。

⑥飼料廠生產(chǎn)全價(jià)飼料：每噸飼料中添加1000克（可以高溫制粒）。

【注意事項(xiàng)】

①飼喂動(dòng)物先溶于5倍以上的溫水中2小時(shí)后，再混合于飼料原料中效果更好；本產(chǎn)品采用多層包被和耐高溫菌種，高溫制粒對(duì)本產(chǎn)品稍有影響但不大，稍微加大使用量即可。

②使用過程中，動(dòng)物的免疫程序、衛(wèi)生防疫照常進(jìn)行，大劑量在飼料中投喂抗生素時(shí)對(duì)效果有影響但可以繼續(xù)使用本品（部分益生菌和酶制劑會(huì)繼續(xù)產(chǎn)生效果），但不會(huì)產(chǎn)生副作用。

③周圍疫情高發(fā)期增加一倍的使用量。

【包裝規(guī)格】500g/包，40包/箱。