摘要：

本試驗旨在研究玉米小曲酒糟全價發酵飼料對育肥豬腸道菌群的影響。以常規飼料為對照，比較發酵飼料對育肥豬增重，以及腸道菌群多樣性、種屬構成及功能的影響。飼喂 47d后，發酵飼料對育肥豬增重及豬肉水分含量、肌內脂肪、pH無顯著影響（P>0.05）。從育肥豬腸道菌群看，小腸中的伯克氏菌屬在群體中的豐度從2.6%增加至50.0%，羅爾斯通氏菌屬、草螺菌、乳桿菌屬、鏈球菌屬的豐度等也有明顯增加，而布勞特氏菌屬、雙歧桿菌屬、嗜冷桿菌屬、芽殖菌屬、梭菌屬、巨型球菌屬豐度明顯下降。KEGG分析發現，發酵飼料對育肥豬腸道菌群生態系統功能的影響主要在于物質代謝的相對增強及細菌增殖的相對減少，促進小腸內物質轉化。本研究為玉米小曲酒糟全價發酵飼料的在生豬養殖中的推廣應用提供了科學依據。

引言：

作為我國重要的生豬養殖基地，西南地區特別是四川盆周山區廣泛種植玉米，其主要用途是直接用作豬飼料，同時也催生了在縣鄉一級大量分布的以玉米為原料的小曲酒生產作坊。這些作坊一般以整粒玉米蒸煮后加入根霉、酵母，按照川法小曲酒工藝固態發酵7-10 d后蒸餾，出酒率在50%左右（折合53%vol白酒計），僅相當于玉米理論出酒率的一半左右。因此小曲發酵后的玉米酒糟與生產食用酒精后的玉米酒糟有很大差異，小曲酒糟玉米粒形態較為完整，且富含淀粉、玉米胚芽蛋白、微生物菌體蛋白、微生物活性代謝產物等，具有較高飼用價值，可直接用于生豬養殖。這些作坊一方面以15000-18000元 /噸為當地中低端白酒市場提供“包谷酒”，另一方面以700-800元/噸為當地養殖業提供玉米酒糟飼料，基本實現了零固廢排放。但玉米小曲酒糟經過蒸餾后活菌均已死亡，不能起到補充腸道益生菌的作用，且營養不夠均衡，還需要添加其他飼料才能滿足生豬營養需求，增加了養殖過程中的繁瑣程度及勞動力投入。因此，在玉米小曲酒糟中添加糧食及其他輔料，通過復合菌劑發酵生產全價育肥豬飼料成為當前鄉村勞動力缺乏情況下的較優選擇。

目前，無抗益生菌發酵飼料是我國飼料產業的主要發展方向，已有菜籽粕、構樹、秸稈、酒糟等多種原料用于發酵飼料的生產，其發酵方式以固態發酵為主。與普通飼料相比，發酵飼料除提供必要的大量或微量營養物質外，其最大的特色在于通過添加益生菌發酵產生多肽、多糖等多種活性成分以改善動物健康狀況，促進增重，改善肉質。目前，豬發酵飼料的研究主要包括新發酵原料的應用、中草藥及飼料酸化劑等輔料的添加，發酵菌種選育、益生菌及其活性產物作用機制等方面的研究，但多數研究成果由于應用效果不穩定、經濟性較差、工藝復雜等原因未能轉化應用。

在前期研究中，本課題組開發了一種玉米小曲酒糟全價飼料發酵技術，用于育肥豬飼養效果較好，因此，本研究通過探討該全價發酵飼料對育肥豬腸道微生物的影響，初步揭示其影響育肥豬生長的主要機制，為該技術在生豬養殖中的進一步完善和推廣應用提供科學依據。

試驗材料

玉米小曲酒糟全價發酵飼料（以下簡稱發酵飼料）：1658kg玉米小曲酒糟，添加玉米粉1720kg、豆粕560kg、其他輔料56kg及由干酪乳酸菌、釀酒酵母、黑曲霉、枯草芽孢桿菌組成的復合菌劑2kg，混勻后按照40kg /袋裝入呼吸袋，常溫發酵5d后備用。育肥豬：36頭平均體重（116±2）kg的外三元育肥豬，由本地養豬場提供。 

試驗設計

隨機選擇36頭體重接近的育肥豬，分成兩組，分置于兩個面積50m2左右的圈舍， 其中18頭采用養殖場自配的玉米-豆粕型日糧（以下簡稱常規飼料），另外18頭飼喂發酵飼料，自由采食，連續飼喂47d，期間觀察豬皮膚、毛色、神態等外觀形態以及糞便顏色、氣味。

數據處理與統計分析生長性能和理化數據結果采用SPSS 22.0軟件包中的One-way ANOVA程序進行單因素方差分析，采用Duncan氏法進行多重比較，以P<0.05為差異顯著性標準。

試驗結果

1、發酵飼料微生物數量分析

發酵飼料中微生物計數結果表明（圖1），發酵飼料菌落總數、乳酸菌數、酵母菌數均顯著（P

2、發酵飼料對育肥豬增重及肉質的影響

使用常規飼料和發酵飼料飼喂的36頭育肥豬增重情況，如表2所示，統計分析表明二者平均日增重、平均日采食量均沒有顯著差異（P>0.05），但發酵飼 料組料重比顯著低于對照組（P>0.05），降低了4.01%。同時，在日常觀察發現，飼喂發酵飼料的育肥豬皮 膚色澤更紅潤有光澤，圈舍內臭味明顯少于對照。比較宰殺后的生豬肉（表2），發現兩個組的豬肉水分含量、肌內脂肪及pH均無顯著差異（P>0.05），但取樣現場我們發現發酵飼料組育肥豬肝臟色澤紅潤均勻，而對照組顏色偏暗、偏紫。 

3、發酵飼料對豬腸道細菌多樣性的影響

從表2可以看出，與常規飼料組相比，發酵飼 料組豬小腸和結腸中檢測到的細菌序列條數和OTU數量均有所增加，特別是小腸增加幅度明顯，其檢測到的序列條數增加了 165.6%，OTU數量增加79.7%，在一定程度上表明飼喂發酵飼料可增加腸道細菌的細胞數量和種屬數量，且小腸比結腸的增加更加明顯;另一方面，不管是常規飼料組還是發酵飼料組，結腸內的細菌OTU數量均低于小腸，可能是由于一些在小腸細菌群體中豐度較低的 OTU進入結腸后逐漸衰亡所致。從小腸和結腸內的細菌α-多樣性來看，不管是飼料類型，還是取樣部位，對細菌菌群多樣性均沒有顯著差異（P>0.05），但飼喂發酵飼料后小腸的指數和指數均小于結腸，也小于常規飼料組的小腸，與序列條數和 OTUs結果相反。

進一步對各組各部位OUT數量分析發現（圖1），有16個OTU在發酵飼料組和常規飼料組的結腸和小腸中均有出現，可能這16個OTU是豬腸道中的 核心菌群。發酵飼料組結腸（Coltmt）和常規飼料組結腸（Colctl）共有74個OTU，發酵飼料組小腸（Intmt）和常規飼料組小腸（Intctl）共有98個OTU。與之相反，Coltmt和Intmt僅共有28個OTU，Colctl和Intctl僅共有48個OUT。

采用Bray Curtis距離、Unweighted Unifrac 距離和Weighted Unifrac 距離均可用于比較不同樣品間的微生物群落構成(β多樣性)，其中Bray Curtis 距離和Weighted Unifrac 距離是結合OTU的豐度信息和系統進化關系獲得的樣本間距離，對豐度較高 的物種更加敏感，Unweighted Unifrac距離主要考慮 物種的有無，對稀有物種比較敏感，其值越小均表 示兩組樣品在物種多樣性方面存在的差異越小。從圖2可以看出，飼料種類和取樣部位均可影響到 育肥豬腸道細菌的β多樣性。當飼料種類相同(發 酵飼料)，小腸（Intmt）和結腸(Coltmt)細菌區系分別以Bray Curtis距離、Unweighted Unifrac 距離、Weighted Unifrac 距離計算的相似性指數為0.929、0.034、0.910；而當取樣部位均為小腸時，則發酵飼料組（Intmt）和常規飼料組（Intctl）的細菌區系三大相似性指數分別為0.854、0.093、0.785，取樣部位均為結腸時，則分別為0.429、0.075、0.624。該結果表明，飼喂發酵飼料后，相對豐度高的種屬表 現出更大的差異性，且對育肥豬小腸細菌區系的影響大于結腸。

4、發酵飼料對育肥豬腸道細菌種屬構成的影響

從圖3可以看出，發酵飼料對育肥豬腸道細菌種屬區系構成有明顯影響。對結腸細菌群落來說，常規飼料組和發酵飼料組的優勢種屬都是Unspeci-fied Clostridiaceae和乳桿菌屬(Lactobacillus)，分別為24.9%和29.0%、28.1%和13.7%。但與常規飼料組相比，發酵飼料組Unspecified_Lachnospiraceae、Unspecified_Clostridiales、密螺旋體菌屬（Treponema）、瘤胃球菌屬（Ruminococcus）、Unspecified_Rumino- coccaceae、Unspecified_S24_7的豐度明顯增加，而梭菌屬（Clostridium）、 鏈球菌屬（Streptococcus）的豐度明顯降低。

5、發酵飼料對育肥豬腸道細菌群落功能的影響

采用KEGG基于種屬變化預測育肥豬腸道細菌功能，以初步評估發酵飼料導致的豬腸道菌群功能變化。從圖5可以看出，兩個組育肥豬結腸細菌菌群功能差異較小，但發酵飼料對育肥豬小腸細菌菌群功能影響較大。在L1級別上，發酵飼料組育肥豬小腸細菌群體代謝功能及細胞轉化功能明顯提升，在L3級別上，發酵飼料組育肥豬小腸內與細菌運動蛋白、物質跨膜運輸、分泌系統、雙組分系統等相關的代謝功能有所增強，而包括氨糖及核糖代謝，核糖體合成，DNA合成相關的嘌呤、嘧啶及DNA修復蛋白相關代謝等卻相對減弱。

試驗結論

本研究通過研究玉米小曲酒糟全價發酵飼料對育肥豬增重和腸道微生物的影響，發現發酵飼料 對育肥豬增重無顯著影響，但對腸道菌群特別是小腸細菌區系有明顯影響，飼喂發酵飼料后育肥豬小腸優勢細菌從變成共存，主要體現為的增加以及的減少，功能預測發現腸道細菌群體的代謝功能相對增強，增殖功能相對減少。

米酒糟在養豬上的運用方法：

米酒糟像粥一樣，較啤酒糟而言，能量更高一些，豬更加喜歡吃，但消化吸收率不高，我們很少用這種酒糟去發酵，因為米酒糟中含酒度高，再發酵會造成酒度的再一次提高，且發酵天數越長，酒度就越高。所以我們一般不建議發酵米酒糟（如需發酵飼喂時則需掌握好飼喂量），可以運用“新鮮酒糟直接養豬營養包”直接混合攪拌均勻后飼喂。

以飼養育肥豬為例，每200-300公斤新鮮米酒糟（建議一周內的，含水量80%以上的）使用本品1包（1000克），分散倒入米酒糟中簡單混勻后直接飼喂，可以不需要飼喂其它飼料，但提高1-2倍使用量或者增加20-50公斤小豬全價飼料混合一起飼喂效果更好。

通過以上兩種方法的處理，不管是啤酒糟還是米酒糟可以用來喂豬。運用后顯著提高肉豬的生長速度和健康程度，養殖區域臭味和氨氣大幅度降低，就連豬肉的品質也得到了極大的改善。

豬健康度高長得快

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